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WB實驗,外包公司怎么處理這些“奇葩”條帶?長沙慧登生物實驗室來告訴你!

Western blot實驗,是一種基于抗原抗體的特異性結(jié)合,半定量檢測樣品中某種蛋白的技術(shù),在分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)等多領(lǐng)域應(yīng)用到。


雖然Western blot實驗看似基礎(chǔ)簡單,但是想做好卻是很難,我們經(jīng)常會遇到各種“奇葩”條帶,那這些是什么原因?qū)е碌哪,我們又該如何解決呢?


WB實驗外包公司長沙慧登生物實驗室,位于湖南長沙,他們擁有經(jīng)驗豐富、技術(shù)嫻熟的專業(yè)團隊,而且還具備良好的實驗設(shè)施和專業(yè)的實驗場地,相信能夠給你提供高質(zhì)量的WB實驗外包服務(wù)。今天就和WB實驗外包公司長沙慧登生物實驗室一起來學(xué)習(xí)下吧~


“奇葩”條帶1. 出現(xiàn)黑點或黑斑


出現(xiàn)此情況的話,原因可能是試劑污染,抗體結(jié)合到封閉劑。WB實驗外包公司長沙慧登生物實驗室建議的解決方法是,可以使用新鮮配置的試劑;過濾封閉液;選用其他類型封閉液。


“奇葩”條帶2. 條帶中出現(xiàn)邊緣規(guī)則的白圈


造成這樣的原因可能是轉(zhuǎn)膜時膜和膠中間有氣泡,或抗體在膜上未均勻分散。WB實驗外包公司長沙慧登生物實驗室建議的解決方法是,制備轉(zhuǎn)膜凝膠時用玻棒趕去氣泡;使用搖床孵育抗體。


“奇葩”條帶3. 條帶拖尾


發(fā)生這情況的原因可能是樣品有未溶顆粒;分離膠濃度偏大。WB實驗外包公司長沙慧登生物實驗室建議的解決方法是,可以充分溶解,加樣前離心;換小濃度分離膠。


“奇葩”條帶4. 條帶扭曲,如微笑帶


可能是因為膠未配好(凝膠未能完全聚合,膠中有顆;驓馀,凝膠未冷卻好);電壓過高。WB實驗外包公司長沙慧登生物實驗室建議的解決方法是,正確添加質(zhì)量合格且未過期的 AP 及 TEMED;過濾配膠的試劑保證配膠過程中膠內(nèi)無氣泡;凝膠冷卻好后再上樣;降低電壓。


“奇葩”條帶5. 出現(xiàn)非均一性背景


膜可能曾經(jīng)干過,所以才出現(xiàn)這樣的問題,WB實驗外包公司長沙慧登生物實驗室建議提醒,在實驗過程中要保證膜一直處于濕潤狀態(tài)。


“奇葩”條帶6. 條帶中間出現(xiàn)白色(反白)


可以自查下,是不是中心部位高濃度 HRP 將底物消耗過快,中間部位底物消耗完后無法發(fā)光。針對這個問題,WB實驗外包公司長沙慧登生物實驗室建議的解決方法是,降低蛋白量,降低一抗與二抗的濃度。


當然,奇葩條帶遠不止上面說的這些,比如高背景、非特異性條帶(雜帶)等等,相信大家也遇到過,那遇到這樣的條帶我們又該怎么處理呢?大家可以直接咨詢WB實驗外包公司長沙慧登生物實驗室客服,24小時在線免費咨詢!

 



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