別忽視，長沙實驗外包公司慧登生物實驗室提醒大家，在Western Blot實驗中，上樣前我們除了配膠、裝板以及配制電泳緩沖液外，拔梳子也是一個關(guān)鍵步驟，搞不好你的膠就歪了！拔梳子時遇到膠歪的情況，不僅會影響蛋白上樣的準確性，還會導(dǎo)致實驗結(jié)果的不可靠性，又得重來！
為什么拔梳子會出現(xiàn)膠歪的情況呢？
最常見（新人常犯）的問題就是時機未到，膠尚未完全凝固，你就拔梳子了。膠尚未完全凝固時，就開始裝板加入電泳緩沖液拔梳子，就很容易造成膠瞬間流動或膠柱殘缺不全，最終導(dǎo)致上樣孔變形。而如果膠到時間還未完全凝固，長沙實驗外包公司慧登生物實驗室此時建議你可以查下是不是試劑的有效性出問題了、配比錯誤或混合不均勻等情況。
其次，梳子與玻璃板不匹配也有可能，如果梳子與玻璃板之間存在間隙或梳子插入時過于緊密，都可能在拔梳子時導(dǎo)致膠歪。因此，長沙實驗外包公司慧登生物實驗室提醒，在灌膠前應(yīng)先測試梳子是否與玻璃板匹配。
也不排除你拔梳子方式不正確，長沙實驗外包公司慧登生物實驗室提醒，拔梳子時用力不均或過快過猛，都可能使梳子孔道的膠發(fā)生歪斜。正確的拔梳子方式應(yīng)該是雙手在梳子兩邊均勻用力，動作緩慢輕柔，邊拔邊看，保證梳子水平地拔出。
當(dāng)然，溫度也會造成影響的，尤其是到冬天，整體氣溫較低，如果真是溫度問題，那長沙實驗外包公司慧登生物實驗室建議你，在實驗室做實驗的時候，凝膠凝固時間適當(dāng)延長。
最后，還可以看看是不是梳子上有雜質(zhì)，因為如果梳子上殘留有雜質(zhì)，在插入膠中時會影響到膠的完整性，拔取時可能會造成上樣孔及膠柱不全的情況。
膠已經(jīng)歪了，那丟掉嗎？有補救的辦法嗎？
方法當(dāng)然是有的，長沙實驗外包公司慧登生物實驗室覺得，這個方法你可以試試！
使用5 mL注射器，然后將注射針頭放于膠柱傾倒處，輕柔多次撥弄，可以慢慢讓膠柱還原。如果膠柱歪倒非常嚴重，只要保證樣品可以加進去即可停止操作。另外，出現(xiàn)膠柱變形后，在上樣時，長沙實驗外包公司慧登生物實驗室建議你，這時候選擇使用細長的槍頭，比如20 uL白色槍頭，這樣可以避免樣品在膠柱上沉積困難的情況。
好了，關(guān)于WB實驗拔梳子膠歪的問題就說這么多了，如果大家對WB實驗還有不明白的或者是需要實驗協(xié)助指導(dǎo)的，可以找長沙實驗外包公司慧登生物實驗室客服老師免費咨詢哦~
