WB實(shí)驗(yàn)中，把PVDF膜疊在一起孵一抗，會影響檢測效果嗎？

為了省錢省事，WB實(shí)驗(yàn)的時候把轉(zhuǎn)好的PVDF膜放在一個容器中一起孵育，會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果嗎？

根據(jù)長沙實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室的WB實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果統(tǒng)計(jì)來看，影響還是很大的：

1、當(dāng)多張PVDF膜疊放時，膜與膜之間的物理接觸會形成屏障，阻礙一抗均勻滲透至每張膜的表面，從而導(dǎo)致抗體結(jié)合效率降低。

2、膜間殘留氣泡形成抗體無法接觸的"盲區(qū)"，這些區(qū)域在后續(xù)顯影中易出現(xiàn)斑駁背景。

3、疊放膜的邊緣區(qū)域因接觸面積差異，常出現(xiàn)抗體濃度梯度，導(dǎo)致WB條帶邊緣模糊或拖尾現(xiàn)象。

4、封閉不完全的區(qū)域在疊膜時相互摩擦，暴露更多非特異性結(jié)合位點(diǎn)，導(dǎo)致背景信號升高。

總的來說，疊膜操作會使目標(biāo)蛋白的抗體結(jié)合效率下降30%-50%，還會增加膜的背景信號，這無疑會導(dǎo)致我們的WB實(shí)驗(yàn)重復(fù)性受損，所以長沙實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室不建議大家在實(shí)驗(yàn)過程中疊膜放。

當(dāng)然，迫于資金和資源的壓力，大家有時候不得不采取這樣的操作WB實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)，既然如此，那長沙實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室建議大家可以優(yōu)化下，可以嘗試將兩張膜一張正面朝下，一張正面朝上背對背放置。

好了，關(guān)于WB實(shí)驗(yàn)PVDF膜疊放的問題就說這么多了，如果大家對WB實(shí)驗(yàn)還有不明白的或者是需要實(shí)驗(yàn)協(xié)助指導(dǎo)的，可以找長沙實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室客服老師免費(fèi)咨詢哦~