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WB實(shí)驗(yàn)提完蛋白后,怎么保存,可以保存多久?

眾所周知,Western Blot(WB)是一種常用的蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù),它的樣品處理和保存對(duì)于實(shí)驗(yàn)的成功至關(guān)重要。


那WB提完蛋白后,我們?cè)趺幢4鏋楹,還有就是我們保存的時(shí)候又有哪些需要注意的呢,今天就和WB實(shí)驗(yàn)外包公司長(zhǎng)沙慧登生物實(shí)驗(yàn)室一起來(lái)學(xué)習(xí)下吧~


首先,樣品不同,保存方法和保存期限各有不同,舉個(gè)例子:


細(xì)胞樣品:懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞提取的蛋白,可以通過(guò)-80℃保存,避免反復(fù)凍融,WB實(shí)驗(yàn)外包公司長(zhǎng)沙慧登生物實(shí)驗(yàn)室提醒,這個(gè)一般保存期限為1年。


組織樣品:動(dòng)物組織提取的蛋白,分裝成合適大小,于-80℃或液氮中保存,避免反復(fù)凍融,WB實(shí)驗(yàn)外包公司長(zhǎng)沙慧登生物實(shí)驗(yàn)室提醒,這個(gè)一般保存期限也是1年。


植物和細(xì)菌樣品:分裝于-80℃或液氮中保存;細(xì)菌培養(yǎng)完成后,收集細(xì)菌后于-80℃或液氮中保存。


磷酸化蛋白樣品:磷酸化蛋白提取后,WB實(shí)驗(yàn)外包公司長(zhǎng)沙慧登生物實(shí)驗(yàn)室建議大家立即進(jìn)行煮沸變性處理,并在3個(gè)月內(nèi)使用,以免長(zhǎng)時(shí)間保存導(dǎo)致磷酸化蛋白去磷酸化而無(wú)法檢出。


當(dāng)然了,WB實(shí)驗(yàn)外包公司長(zhǎng)沙慧登生物實(shí)驗(yàn)室提醒大家,在保存樣品時(shí),我們也應(yīng)注意以下幾點(diǎn):


1、避免反復(fù)凍融:凍融循環(huán)會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的變化,因此在保存時(shí)應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融。


2、分裝保存:將樣品分裝成小份,每次取出適量進(jìn)行實(shí)驗(yàn),剩余的繼續(xù)保存,以減少凍融次數(shù)。


3、添加保護(hù)劑:在保存時(shí)可以添加適量的蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,以防蛋白降解。


4、煮沸變性:對(duì)于磷酸化蛋白樣品,提取后應(yīng)立即進(jìn)行煮沸變性處理,并在短時(shí)間內(nèi)使用,以保證磷酸化狀態(tài)的穩(wěn)定。


好了,關(guān)于WB實(shí)驗(yàn)提完蛋白后怎么保存的問(wèn)題就說(shuō)這么多了,如果大家對(duì)WB實(shí)驗(yàn)還有不明白的或者是需要實(shí)驗(yàn)協(xié)助指導(dǎo)的,可以找WB實(shí)驗(yàn)外包公司長(zhǎng)沙慧登生物實(shí)驗(yàn)室客服老師咨詢哦,24小時(shí)在線免費(fèi)咨詢~



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