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為什么實(shí)驗(yàn)前需要進(jìn)行細(xì)胞饑餓處理?

細(xì)胞饑餓處理,是指在實(shí)驗(yàn)開始前將細(xì)胞在無血清或極低血清的培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間,人為制造一個(gè)“營養(yǎng)匱乏”狀態(tài),那為什么實(shí)驗(yàn)前需要進(jìn)行細(xì)胞饑餓處理呢?今天就讓長沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室來告訴你吧!


細(xì)胞進(jìn)行饑餓處理,有以下幾個(gè)好處:


1、同步化細(xì)胞周期,消除個(gè)體差異


饑餓處理后,細(xì)胞因缺乏生長信號而無法通過G1/S檢查點(diǎn),絕大多數(shù)細(xì)胞會(huì)停滯在G0/G1期(靜息期),這樣整個(gè)細(xì)胞群體就被“同步化”在了一個(gè)相同的起點(diǎn)。當(dāng)我們后續(xù)施加刺激(如加入某種生長因子、藥物)時(shí),所有細(xì)胞幾乎同時(shí)被“喚醒”并進(jìn)入細(xì)胞周期,從而確保了反應(yīng)的一致性和可重復(fù)性。


2、降低基礎(chǔ)信號通路活性,突出實(shí)驗(yàn)刺激


長沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室提醒大家,完全培養(yǎng)基中的血清本身就是一個(gè)強(qiáng)烈的“混合刺激劑”,它持續(xù)激活細(xì)胞內(nèi)的多條信號通路,如MAPK/ERK通路、PI3K/Akt通路等,這些通路處于持續(xù)的高背景活性狀態(tài),撤除血清相當(dāng)于撤除了這些持續(xù)的刺激,經(jīng)過一段時(shí)間的饑餓,這些信號通路的活性會(huì)降至基礎(chǔ)水平。此時(shí),當(dāng)你加入你想要研究的特定刺激物(如EGF, Insulin等)時(shí),它所引發(fā)的信號通路激活會(huì)非常顯著和清晰,而不會(huì)被高背景噪音所淹沒。


3、耗盡細(xì)胞內(nèi)源代謝產(chǎn)物,減少干擾


長沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室告訴你,對于一些研究代謝、自噬或特定分子分泌的實(shí)驗(yàn),完全培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)可能使細(xì)胞處于“飽食”狀態(tài),抑制了某些通路(如自噬)。饑餓處理可以消耗掉細(xì)胞內(nèi)的糖原、氨基酸等儲備,從而誘導(dǎo)自噬或讓細(xì)胞對后續(xù)的代謝干預(yù)更加敏感。


4、排除血清中未知成分的干擾


血清成分復(fù)雜,含有成百上千種蛋白質(zhì)、激素、細(xì)胞因子等,長沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室提醒你,這些未知或已知的成分可能會(huì)與你的實(shí)驗(yàn)處理發(fā)生不可預(yù)知的相互作用,或直接影響你的觀測指標(biāo)(如磷酸化水平、基因表達(dá))。而饑餓處理使用成分明確的無血清培養(yǎng)基,為實(shí)驗(yàn)提供了一個(gè)干凈、可控的背景。


當(dāng)然了,進(jìn)行細(xì)胞饑餓處理時(shí),長沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室提醒大家,這些問題要注意:


1、饑餓時(shí)間不要過長:過長的饑餓會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞活力下降、啟動(dòng)凋亡,反而引入新的變量。


2、并非所有實(shí)驗(yàn)都需要饑餓:比如基礎(chǔ)增殖實(shí)驗(yàn)、毒性實(shí)驗(yàn)、某些分化實(shí)驗(yàn)等等。


好了,關(guān)于細(xì)胞饑餓處理的問題就說這些了,當(dāng)然,如果大家還有不明白的或者是需要實(shí)驗(yàn)協(xié)助指導(dǎo)的,可以直接咨詢長沙細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包公司慧登生物實(shí)驗(yàn)室哦,24小時(shí)免費(fèi)咨詢!



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